ензимен метод за рециклиране , за GSH , използва глутатион редуктаза количествено GSH . Този протокол е специално за плазма, тъкани или култивирани клетъчни проби . Добави DTNB на реагент ( 5 - 5' - дитио - бис - 2 - нитробензоена киселина ), за да GSH . На сулфхидрилната група на GSH реагира с реагент , като се получава жълт киселина , наречен 5 - тио - 2 - нитробензоена киселина ( TNB ) . Добави глутатион редуктаза да киселина и GSH смес за рециклиране на GSH и произвежда повече киселина. При тази процедура , скоростта на отделянето на киселина е пропорционално на реакцията на рециклиране на GSH; Следователно , се измерва абсорбцията на TNB киселина , като се използва спектрофотометър. Абсорбцията предвижда оценка на действителния размер на GSH в пробата.
Liver Cell Глутатионът Състав
Този протокол анализи на размера на GSH в човешкото развитие на хепатоцелуларен карцином ( рак на черния дроб ) клетки . За извършване на тази процедура , се използва колориметричен метод за GSH решимост да намали и окисляват GSH . Намаляване на GSH се използва 5 - 5' - дитиобис ( 2 - нитробензоена киселина или DTNB ) до получаване на
оцветен продукт 2 - нитро - 5 - тиобензоена киселина и окислен глутатион ( GSSG ) . Използвайте глутатион редуктаза намаляване GSSG да образуват GSH отново . За да се измери количеството на GSH в клетките на черния дроб , се чете на пробата при 415 абсорбция кинетично на микроплоча .